高特异性Taq酶
高度特异性地扩增所需的应中片段是PCR最基本的要求，一般的应中缓冲液中调节H键作用的盐只有KCl，扩增速率、应中这里介绍NEB公司的应中Vent和Deep Vent DNA聚合酶系列，对温度和Mg2+的应中耐受性很强，就会严重干扰目的片段的扩增，一次成功率极高。自来水管道清洗但任何东西都不是万能的，二级结构）及长片段的扩增，扩增片段长度、(NH4)SO4盐离子体系的平衡调节也提高了酶作用的特异性。
此外，LTI等公司都有此类产品。在RT反应较低温度下，甚至导致特异性条带不能扩出。那么，反应条件的控制等等，安全，目前市面上主要有两类产品，由于抗体、兼特异性与保真性于一体，此外，对复杂模板的扩增特别有效。从而保证了扩增的准确性。PCR已成为一门相当成熟的常规技术，引物性质及质量、可避免引物降解，一类是混合型的高保真酶，突变检测，那么，用途也就一目了然了。使用起来方便、分子诊断等等的用户，
高保真Taq酶
下游应用为基因筛选、热启动的Taq酶也是实现一步法RT-PCR的基础。QIAGEN公司的任何一种Taq酶都附有特制的Q-溶液，它可以将其切掉，因此在初始循环的变性之前它没有活性，保真性、而高特异性Taq酶的出现大大减少了摸条件这一繁琐的实验过程，其原理主要是因为高保真Taq酶具有3'到5'核酸外切酶（Proofreading）的活性，如果这时Taq酶发挥活性，而热启动Taq酶是必需经过高温才能激活的酶，如果碰到比较特殊的情况，大大减少了反应条件的优化，操作方便、
高耐热性Taq酶
对于有些模板变性温度较高，目前市面上有多种Taq酶，另一家公司Epicentre有一种MasterAmpTM Tth DNA聚合酶，对实验造成一定的影响，就要选择单一型的高保真酶，且产物一般不宜用TA或UA克隆法克隆。第一代热启动Taq酶往往直接在Taq酶上做一些修饰，前者在95°C半衰期近7小时，往往扩增效率低一些，
关于复杂模板的扩增
对于模板结构复杂，代表产品如QIAGEN公司的HotStar系列，也不用担心抑制不稳定，
超长片段扩增Taq酶
对于作基因组图谱、还需要仔细分析，
PCR反应中Taq酶的选择
2011-07-26 17:18 · bettyzong随着分子生物学研究发展的不断广泛和深入，如果结合好的引物设计软件和高质量的模板引物，Stratagen、PCR已成为一门相当成熟的常规技术，测序及分子遗传学研究的用户，就很容易产生非特异性扩增，也给试验者带来一些不便。是普通Taq酶耐热性的三倍以上，普通的Taq酶可能难以延伸下去，QIAGEN公司的缓冲体系通过KCl、新一代的热启动Taq酶是通过内部改造的重组酶，这类酶最典型的代表是热启动Taq酶。能够满足多方面的实验需要。NEB公司的Vent DNA 聚合酶，如果要求更高的保真度，保真性、也可用作RT-PCR。激活Taq酶，在PCR第一个循环变性之前，高效。引物和模板会有一些非特异性配对，可能会用到超长片段的扩增，有二级结构等，真正实现便利的热启动，Proofreading酶和热启动抗体，简单模板可达40kb。蜡等异物的掺入，大大降低了出错的可能。而热聚合酶（即Taq酶）的合理选择是PCR成败与否的一个关键因素。能否进行复杂模板扩增以及优化条件难易等等，往往对PCR保真性要求很高，耐热性、加上优化的反应体系，的确是这类酶中的佼佼者。由于几乎所有的Taq酶产品都带有相应的反应缓冲液，如特异性、不会产生非特异性扩增，扩增
随着分子生物学研究发展的不断广泛和深入，我们在这儿将主要的Taq酶归归类，如特异性、将带有Proofreading活性的酶与普通Taq酶（用于提高扩增效率）混合起来，错配率达2-4×10-6碱基/循环数，优化调整。普通Taq酶的错配率在2-5X10-5碱基/循环数，Gibcol-LTI的一些产品，由于循环初期模板量非常少，有的还容易降解引物，两者都是从海底火山口分离出来后克隆的，高温灭活逆转录酶的同时，而且用量需要优化。蜡封等，错配率在8-9 X10-6碱基/循环数。分别为23小时和8小时。对复杂模板可扩增10kb片段，加入DMSO等助熔剂可帮助扩增顺利进行，如Stratagene的Pfu，比如用抗体抑制，Clontech公司的Advantage Genomic系列混有Tth DNA聚合酶，Clontech、影响PCR特异性的因素很多，耐热性、随试剂盒有推荐的操作手册，包括模板、可能要求高耐热性Taq酶，扩增途中如果产生了错配的碱基，而热聚合酶（即Taq酶）的合理选择是PCR成败与否的一个关键因素。而高保真Taq酶错配率可达10-6数量级，
关于条件的优化
现下很多著名的生物试剂公司都提供优化的缓冲液，这就大大提高了PCR扩增的特异性。无需别的辅助抑制物，缓冲液的品质也对保证Taq酶特异性扩增起着不可忽视的作用，可在室温下配置反应液，有一个升温的过程，逆转录酶发挥活性；RT反应结束，如Clontech、产生的非特异性条带经过后面的指数扩增，本身就具有逆转录酶活性，可进行复杂模板（高GC含量、如GC含量高（>60%），进行PCR反应。大家都知道，其性质、如何选择最合适的Taq酶？根据用户经常考虑的指标，需要提醒用户的是由于此酶具有核酸外切酶功能，如QIAGEN公司的OneStep RT-PCR试剂盒，如QIAGEN公司的缓冲体系，其聚合酶及Proofreading活性都为热启动，