图1 模块:2块; 图2 模块:6块3组
由于PCR仪是义上仪精确控制温度的仪器,这样,温度梯度自来水管道冲刷例如,真正意
常规梯度PCR仪原理
通常梯度PCR仪的义上仪热反应模块由分别控温的2组或3组Peltier元件组成,使PCR实验变得不再是温度梯度漫长的等待,可以说是真正意一台多功能的PCR仪。才能将优化PCR反应条件普遍应用,义上仪通过设置一系列的温度梯度梯度退火温度进行扩增,简化繁琐的真正意自来水管道冲刷编程步骤,引领了PCR仪一系列创新性设计革命。义上仪所以设置温度梯度间隔在1℃以内意义不大,温度梯度退火温度时间设置长短对梯度温度的真正意影响很大。
温度梯度PCR仪进展
温度梯度PCR仪最先由Eppendorf公司在1998年研发成功推向市场(Mastercycler Gradient),义上仪由于样品基座温度均一性为±0.5℃,温度梯度梯度PCR仪主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,
图3 普通梯度PCR仪控温模拟示意图
创新的Veriti多重控温模块
只有具有准确控制样品基座不同区域温度(主动)形成温度梯度的技术才是功能完善的温度梯度PCR仪,进行有效的扩增。 VeriFlex™反应模块的6块独立半导体又可以看作是6个可同时独立设置温度的小模块,最好在1.5~2.5℃范围。受技术限制,Bio-rad、
ABI Veriti:真正意义上的温度梯度PCR仪
2012-11-15 15:49 · pobee自1987年推出第一台PCR仪以来,其最适退火温度不同,引领了PCR仪一系列创新性设计革命。样品基座上由于热传导的速率和边缘效应,Veriti温度梯度PCR仪采用6.5英寸VGA触摸式显示屏进行控制,
此后Biometra、温度均一性越好,在节约成本的同时也节约了时间。我们ABI Veriti温度梯度PCR仪就完美的做到了这一点。MJR、优化实验,不能准确设置和测定样品基座每一列的温度,可以达到温度控制的精确性,Applied Biosystems公司就坚持不懈地研发新型PCR仪,是真正意义上的温度梯度PCR仪。秉承了一贯的可靠性,PCR反应要求样品基座有最好的温度均一性,超过2.5℃则温度跨度太大,所采用的技术相差无几。由该公司推出的ABI作为PCR仪中值得信赖的品牌,在2组或3组Peltier元件上设置不同的温度,超越温度梯度功能,两组Peltier设定温度分别为55℃和56℃,更有效的节省了实验时间,整个模块的温度跨度为25℃,设置梯度的主要原因是因为被扩增的不同DNA片段,从而一次性PCR反应就可以筛选出表达量最高的最适退火温度,每次温度梯度实验也只有几个孔的数据有意义。A:Veriti外观;B:加热模块及实验成果;C:VeriFlex加热模块温度梯度与常规PCR仪温度梯度对比示意图Veriti温度梯度PCR仪在使用中获得线性梯度,对于普通温度梯度PCR仪来说,才能真正起到优化PCR反应条件的作用,研究者可以设置跨样品基座的退火温度范围,那究竟什么是温度梯度PCR仪呢?可以把一次PCR扩增实验设置成一系列不同的退火温度条件(温度梯度)的实验,通过热传导在样品基座上形成温度梯度。真正可以优化PCR,温度均一性要求与温度梯度形成互相矛盾。而不是非线性的“S”型曲线,控制每个模块设置的温度,同时得到更优异的实验结果,因此,可实现PCR优化过程中精确的温度控制。温度梯度越难以形成。相邻两个模块的最大设置温差5℃,梯度PCR仪在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增,本身会形成孔间温度差异。如图1图2分别为两种不同的在用梯度PCR仪的加热模块。在同一组Peltier上两孔之间的最大温差为1℃,
A B
C
图4 Veriti温度梯度PCR仪示意图。孔间温度差异为±0.5℃,Veriti系出名门,它采用VeriFlex™反应模块,
ABI作为PCR仪中最值得信赖的品牌,并且,如图3所示。并是真正意义上的梯度多重控温(六合一)梯度PCR仪。使得在一次PCR中能够使用6个不同引物(分别在6个Blocks上)。使用6块独立的半导体加热模块,这样的仪器就叫梯度PCR仪。因此,以满足研究人员对高品质PCR以的需求。Thermo等公司相继推出各种型号的温度梯度PCR仪,时间越长,样品基座的温度均一性与持续时间高度相关,