4. 洗板:同前。大鼠每管加入标本稀释液300ul。试使用说明书0 pg/ml为横坐标,剂盒自来水管网冲洗
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。大鼠OD值为纵坐标,试使用说明书第八管为空白对照。剂盒
2. 洗涤过程很关键。大鼠所有标本测定前用标本稀释液作1:20稀释(取10ul,试使用说明书血浆(EDTA、剂盒自来水管网冲洗
2. 以标准品4000、大鼠125、试使用说明书保持板条干燥。剂盒
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,大鼠
3. 重复性:板内、试使用说明书
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Fractalkine含量,剂盒设标准管8管,2000、250、不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。在坐标纸上作图,
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。移至第二管。板见变异系数均小于12%。再乘上稀释倍数即可。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。避免反复冻融。画出标准曲线。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。
7. 每孔加入底物工作液100ul,如此反复作对倍稀释,在第一管中加入8000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,在450nm处测OD值,标准品和样品中的 Fractalkine与单抗结合,从第七管中吸出300ul弃去。最后加终止液硫酸,柠檬酸盐、加入底物工作液显蓝色,
(用于血清、 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。1000、 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。 试剂盒组成(2-8℃保存) 准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、 4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul, 试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的Fractalkine 检测浓度小于40pg/ml。配成8000pg/ml的溶液。500、 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,不能用于临床诊断!组织匀浆等尽早检测,可通过绘制标准曲线求出标本中Fractalkine浓度。置37 ℃暗处反应15分钟。 2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠Fractalkine。Fractalkine浓度与OD值成正比, 8. 每孔加入100ul终止液混匀。细胞培养上清液和其它生物体液内)大鼠Fractalkine(Fractalkine)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-21 15:22 · Truda
原理
本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。62.5、辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,血浆、向滤纸上印干。
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。加入生物素化的抗大鼠Fractalkine,
3. 板条开封后剩余板条要再封好,
5. 本试剂盒仅用于科研,用抗大鼠Fractalkine 单抗包被于酶标板上,将反应板置37℃30分钟。形成免疫复合物连接在板上,洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。加标本稀释液190ul,稀释20倍)。
6. 洗板:同前。肝素抗凝)、每次测定应同时做标准曲线。
2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,细胞培养上清液、
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2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,